Una de las formas de valorar el grado de maduración de los frutos de pimientos es a través del análisis de los pigmentos fotosintéticos. No olvidemos, al ser frutos climatéricos, los pimientos cortados verdes no maduran, pero cuando este proceso se ha iniciado (y los pimientos muestran zonas que comienzan a enrojecer) continua hasta que el pimiento se vuelve rojo. Cuando los frutos son verdes, los niveles de clorofilas son muy altos, pero a medida que maduran se reduce el contenido de estas moléculas en favor de los carotenoides, de color rojo.
El pasado viernes dedicamos la sesión del proyecto a valorar los pigmentos fotosintéticos de los pimientos. Un día antes habíamos preparado los extractos triturando 0,9 gramos de fruto en 18 mL de etanol. Las muestras se dejaron macerando en el frigorífico durante 20 horas. Pasado este tiempo se centrifugaron los extractos a 5000 rpm durante 5 minutos y se estudió la absorbancia con la ayuda del espectrofotómetro. Las medidas se hacen a longitudes de onda de 470 nm, 649 nm y 665 nm. En algunos casos, y dada la concentración de carotenoides, se hicieron diluciones para no superar el umbral de medida del espectrofotómetro.
La tabla anterior muestra las lecturas, ya corregidos los valores en función de las diluciones que se hicieron. Como véis, para cada muestra se tomaron tres medidas, a las que se ha hallado el valor medio. A partir de estos datos podemos calcular la concentración de clorofila a, clorofila b y carotenoides gracias a las ecuaciones de Pompelli:
Con los valores medios de la tabla anterior hay que calcular la concentración de pigmentos en los frutos según el tratamiento. Esperamos los valores que obtengáis en los comentarios.
La concentración de pigmentos en los frutos según el tratamiento:
ResponderEliminarAgua:
Clorofila a : 13,36 x A664 - 5,19 x A649 =13,36 x 0,001- 5,19 x 0,000 = 0,01336 μg/mL
Clorofila b: 27,43 x A649 - 8,12 x A664 = 27,43 x 0,000- 8,12 x 0,001 = -0,008 = 0
Carotenoides: [1000 x 1,226- 2,13 x 0,01336- 97,64 x 0] /209 = 5,865 μg/mL
GSNO:
Clorofila a: 0,22645 μg/mL
Clorofila b: 0,17795 μg/mL
Carotenoides: 8,77 μg/mL
NaSH:
Clorofila a: 0,98452 μg/mL
Clorofila b: 0,85816 μg/mL
Carotenoides: 4,87 μg/mL
Etanol:
Clorofila a: 0,21386 μg/mL
Clorofila b: 0,30698 μg/mL
Carotenoides: 5,35 μg/mL
Capsaicina:
Clorofila a: 0,20713 μg/mL
Clorofila b: 0,09259 μg/mL
Carotenoides: 9,806 μg/mL
Melatonina:
Clorofila a: 0,21386 μg/mL
Clorofila b: 0,30698 μg/mL
Carotenoides: 8,131 μg/mL
A partir de estos resultados, podemos observar que la concentración de carotenoides es mayor que la de clorofilas. Esto es característico de los pimientos en etapas avanzadas( rojos) , donde la clorofila se degrada y los carotenoides se vuelven los pigmentos dominantes. Además, el pimiento tratado con capsaicina presenta la mayor concentración de carotenoides (9,806μg/mL). En cambio, el pimiento tratado con NaSH muestra una mayor concentración de clorofila a y b.